乳酸脱氢酶细胞增殖及毒性检测试剂盒
LDH Cell Proliferation And Cytotoxicity Assay Kit
AKCE003-1
110T/100S
酶标仪
100 Samples
产品信息
LDH Cell Proliferation And Cytotoxicity Assay Kit
100 Samples
酶标仪/96孔板
-
按照标签要求储存
检测原理
LDH可催化乳酸转化为丙酮酸,同时使氧化型辅酶I(NAD)还原为还原型辅酶I(NADH)。生成的NADH在递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)的作用下,将碘硝基氯化四氮唑(INT)还原为紫红色甲臜化合物。产物在490 nm处具有特征吸收峰,通过吸光值变化即可表征LDH的活性,通过对LDH活性的定量分析,可间接反映细胞的损伤程度。
  • INT法
  • 490 nm
  • 递增型
注意事项

①操作过程中应避免细胞样本溶血,以避免红细胞内的LDH干扰结果;

②由于使用96孔板进行检测,若细胞培养时间较长,需注意蒸发的问题。可以采取弃用周围一圈的办法,改加PBS、蒸馏水或培养液;也可将96孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以减少蒸发;

③如果检测细胞培养液中的乳酸脱氢酶,由于血清含有乳酸脱氢酶,建议血清的使用浓度不要超过1%,并最好使用热灭活血清;

④离心步骤对于获得澄清上清液至关重要,可用多孔板离心机或小心移取上清液至离心管中离心;

⑤接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不等,可以每接种几个孔就混匀一次;

注: 为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书为准),确认试剂储存和准备是否 充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异交的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。
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