货号末尾是C或者U的产品需要用分光光度计检测：其中货号末尾是C的产品检测波段是可见光波段（400 nm-1900 nm），搭配1 mL玻璃比色皿或石英比色皿（光径10 mm）使用；货号末尾是U的产品检测波段是紫外波段（190 nm-400 nm），搭配1 mL石英比色皿（光径10 mm）使用。货号末尾是M的产品需要用酶标仪检测：搭配96孔板（360-1100 nm）或96孔UV板（190-1100 nm）使用。

Boxbio生化试剂盒每个检测指标都是有两种规格，货号尾号为C或U（匹配分光光度计）；货号尾号为M（匹配酶标仪），根据您的设备情况选择相应产品就可以的。

1、不可以通用，两种试剂盒虽反应原理相同，但试剂浓度和标曲设置均不相同，根据不同的检测设备调试了不同的试剂浓度和体系，建议根据设备类型选择相应产品，保证试验结果的准确性和可靠性。

2、不可以通用，两种试剂盒根据不同的检测环境设计了相应的反应体系和试剂浓度，并按照标准流程进行开发和验证，每种试剂盒均有相应的验证数据，若用户自行混用，公司将无法提供相应的技术支持。

可以，产品试用装规格一般是10S。

注意：部分产品试剂成分极其微量，所以不能继续减小试剂量，即不能提供试用装，能否提供试用装要经过技术的确认。

酶（Enzyme）是由活细胞产生的、对其底物具有高度特异性和高度催化效能的蛋白质（或RNA），即酶是具有催化活性的蛋白质，其具有催化特性和蛋白质基本属性。

酶活性测定的意义和方式

酶的催化特性分析：因为酶是具有催化活性的，一般对酶的特性研究大多集中在其催化能力方面进行分析，即以酶活性对样本中催化能力和酶含量（间接）的高低进行评价，比如酶的最适催化条件是什么，不同样本间酶的催化能力差别多大等等。

酶活性测定方法：通过专一性底物催化来测定酶的活性，单位一般以U（酶活力单位）表示。

酶含量测定意义和方式

酶的蛋白属性研究：比如酶的合成机理，酶分子表达量，蛋白组成结构等研究时是需要准确知道蛋白含量多少（μg/mL），蛋白的分子量多少（KD），蛋白氨基酸序列是什么样的，这个时候就需要准确的知道酶的含量是多少。

酶含量测定方法：一般是通过抗原和抗体免疫反应来直接测定酶的质量，直接用质量单位ng/mL、μg/L来表示酶含量的高低。

未拆封试剂盒保质期：指试剂盒内试剂未拆封使用，按照试剂盒保存温度储存，有效期为6个月。

注意：仅有以下试剂盒保质期为1年

A2：拆封后试剂盒保质期

液体试剂：与试剂盒保质期一致，但考虑试剂新鲜度随时间降低，推荐开封后3个月内使用完；

固体试剂：现场配制后按照说明书要求使用（产品内容中的使用说明及注意事项），一个月内保质期的会写明具体时间（1周或2周），未注明的推荐复配后1个月内使用完成；

现场配制多试剂复配或稀释后使用的试剂：说明书中写有现用现配且限定有效期的，按说明书执行，未限定有效期，一般当天使用；

标准品：配制后建议2周内使用，可密封保存最长时间不超过1个月；配制后标准液因挥发、试剂变化、非无菌环境、储存条件等因素发生浓度变化，建议短时间内使用；

标准稀释液：建议稀释后当天使用，因标准稀释液浓度低，易产生误差，标准曲线要求精度较高，建议当天使用，不建议储存。

其它情况单独试剂需要确认有效期，可以技术沟通解决

A3：关于试剂收到产品货期

为便于进行产品库存管理，保证客户产品有效期，公司内生产库存时间管理目前按照入库后2个月为库存最长时间，库存产品超期后公司内部报废出库，即客户收到的产品有效期至少能够保证还有4个月，完全满足正常使用。

未拆封在有效期内使用即可，拆封后配制为标准液，建议在1周内测完

Boxbio活性氧检测试剂盒仅适用于细胞样本或部分动物组织（可制备为单细胞悬液）。

注意：植物组织因存在细胞壁并不适用，细菌和真菌等微生物并不适用。

可以的，大部分试剂盒都可以检测细菌样本，可以根据说明书中细菌或细胞样本方式处理样本。

注意：①若试剂盒中没有给出细菌或细胞样本处理方法，需向技术确认是否可以检测；②客户给出具体细菌或细胞名称，表明客户想确认一下该种属是否能够检出，需向技术确认；③微生物样本种属很多，主要分为细菌、真菌和病毒，样本类型多为前两者，细菌大部分能够按照说明书方法检测，真菌类样本需要想技术确认样本处理方式。

可溶性蛋白指以小分子状态溶于水或其他溶剂的蛋白，通常在植物生理、微生物、食品加工等实验中作为重要指标，如可溶性蛋白是植物抗旱性的重要指标之一。

Boxbio有四种蛋白含量检测试剂盒（官网搜索“蛋白含量”），均是可溶性蛋白含量检测试剂盒，优先推荐Bradford法蛋白含量检测试剂盒（AKPR015）和BCA法蛋白含量检测试剂盒（AKPE017）。

需要根据两个方向进行选择：①客户研究目的，更加关注那个类型的酶活性变化；②若客户没有制定pH，则根据客户样本pH进行推荐，相应样本pH对应的活性最高；

举例:客户需要检测土壤样本中蛋白酶活性，推荐三款后客户无法确定选择测定哪一个，询问客户土壤样本pH大概多少，根据pH酸碱度确定推荐哪一款即可，并说明因环境适宜该酶活性会高于另外几种。

血清铁为血清全铁专用型试剂盒，仅限定做血清、血浆和全血类样本测定。 注意：血清铁为液体样本，所以部分液体样本也是可以通用的，但需要与技术确认是否可以检测。

细胞壁代谢主要涉及两个方面的产品：细胞壁组成组分含量的检测和相关代谢酶活性测定。如纤维素含量、半纤维素含量、木质素含量、D-木糖和果胶含量变化，纤维素酶、果胶酶等指标可进行相应推荐，详见领域专题。

磷及其化合物的分类

检测限：检测限（LOD, limit of detection）又称为检出限，指某一分析方法在给定的可靠程度内能够从样品中检测待测物质的最小浓度或最小量，即从样品中测出待测物质能区别于零值的最小浓度或最小量，可用于断定样品中确定存在有浓度高于空白的待定物质，是方法（MDL）和仪器（IDL）灵敏度体现的重要指标之一。

举例：例如葡萄糖含量检测试剂盒检测限为0.002 mg/mL，即样本中低于0.002 mg/mL该方法就无法定性产品中含有葡萄糖了，高于0.002 mg/mL则可以定性样本中是含有葡萄糖的；检测限越低一般对样本中葡萄糖含量的要求就越低，表明方法更加灵敏，可用于方法的评判和选择，但一般我们不用于决定客户的样本能否测出。

通俗举例：两种方法对于粉尘颗粒进行观察：①肉眼观察方法检出限为直径1 mm颗粒，小于1 mm颗粒肉眼不可见；②显微镜方法观察检出限0.1 mm颗粒，小于0.1 mm颗粒无法观察；

方法初筛：客户想检测0.5 mm颗粒，肯定会选择显微镜方法，不会选择肉眼观察方法，因灵敏度不够；

相同方法选择：A厂家检出限0.1 mm，B厂家检出限0.2 mm，那选择时候可能会优选A厂家，因为检出限更低，表明方法可能更加灵敏、设备更加精密。

A：检测范围（标准线性范围）：检测范围是指该方法所能准确定量检测的最小值到最大值范围，试剂盒中一般指标准曲线中最低标准品浓度到最高标准品浓度即为检测范围，超过检测范围就会造成结果误差。

举例：例如葡萄糖含量检测试剂盒检测范围为0.025-0.4 mg/mL，即样本中低于0.025 mg/mL样本含量则会被低估，高于0.4 mg/mL则样本浓度倍低估，只有在范围内的才是准确的，。

值得注意的是我们标准线性范围最低点是0.025 mg/mL，是大于检出限0.005 mg/mL的，并且客户问检出限或样本能不能检测出的时候一般我们会给0.025 mg/mL，因为虽然大于0.005 mg/mL能够检出了，但并不处于标准曲线线性范围，直接定量会造成结果误差。换句话说0-0.005 mg/mL范围内是没有办法检出的，0.005 mg/mL-0.025 mg/mL虽能检出但误差较大，0.025 mg/mL-0.4 mg/mL是能够正常检测的，大于0.4 mg/mL过高了需要稀释。

通俗举例：几个人喝酒，需要达到微醺状态才能尽兴，抿了一口虽然喝酒了（达到检出限了）但一点感觉没有，喝了一杯开始有点心跳加快开始微醺了（达到标准浓度最低值了），喝了五杯有点顶了但还清醒（达到标准浓度最高值了），超过五杯晕了吐了（超标曲最高值了）；下次找人喝酒微醺就好，那就得在1-5杯内喝。不同试剂盒代表不同的人，酒量不同所以达到微醺的区间也是不同的，也就有了不同的标准线性范围。

试剂盒的酒量是研发团队设计的，对体系优化的其中很重要的一点就是，降低微醺开始的酒量（喝一点就能微醺，跟酒量不是很高的样本也能喝得很开心）和放大微醺能承受的最大酒量（能够一直喝喝到酒量最好的样本都趴下了还能保持微醺状态）。

有人问了我喝多少算微醺啊，你就告诉喝一杯以上就微醺了，不能说喝一口就微醺了，这就是为什么客户问能不能测的时候告诉标曲最低浓度值，而不提供检出限的原因。

酶单位定义：在一定条件下，一定时间内将一定量的底物转化为产物所需的酶量

1）国际单位定义：在最适反应条件下，每分钟内催化1微摩尔底物转化为产物所需的酶量为一个酶活力单位，1 IU=1 μmol/min

2）行业定义

①根据吸光值定义：

谷氨酰胺合成酶（AKAM008C)：每 g 组织每分钟使 540 nm 处吸光值变化 0.01 定义为一个酶活力单位。

AKAM008M：每 g 组织每分钟使 540 nm 处吸光值变化 0.005 定义为一个酶活力单位。

②根据产物摩尔质量定义：

土壤谷氨酰胺酶（AKAM027）37℃条件下每 g 土壤每天催化谷氨酰胺生成 1 μmol 氨定义为一个酶活力单位。

③根据产物质量定义：

纤维素酶（AKSU043）：每 g 组织每分钟催化产生 1 μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

①真核表达纯化后的蛋白，若为粉剂样本，按照组织样本进行处理后检测；若为液体样本，直接按照液体样本检测即可。

②原核表达纯化后的蛋白，原核表达容易形成包涵体，需新进行变复性处理，复性后的蛋白具有酶活性之后再按照组织或液体样本进行处理后检测。

组织冰浴匀浆即低温条件下制备匀浆的过程，一般分为以下几种方法

1.植物组织

①冰浴+研钵：称取适量样本（一般为0.1 g）置于研钵中，加入提取液，冰上使用研钵研磨至匀浆状态，转移至离心管中，离心取上清即为待测样本；

②液氮+研钵：称取适量样本（一般大于0.1 g）置于研钵中，使用液氮在研钵研磨至粉末，称取研磨后粉末至离心管中，加入提取液充分振荡混匀，离心取上清即为待测样本。

③组织研磨仪（磁珠法）：称取适量样本（一般为0.1 g）置于研磨离心管中，加入提取液和磁珠，置于组织研磨仪中研磨至匀浆状态，离心取上清即为待测样本；

注：测定酶活性指标推荐使用①和③匀浆方式，测定含量指标三种方式均可；

2.动物组织

①冰浴+玻璃匀浆器：称取适量样本（一般为0.1 g）剪碎后置于玻璃匀浆器中，加入提取液，冰上使用玻璃匀浆器研磨至匀浆状态，转移至离心管中，离心取上清即为待测样本；

②研磨杵+电动组织研磨器：称取适量样本（一般为0.1 g）剪碎后置于离心管中，加入提取液，使用电动组织匀浆器研磨至匀浆状态，离心取上清即为待测样本。

③组织研磨仪（磁珠法）：称取适量样本（一般为0.1 g）置于研磨离心管中，加入提取液和磁珠，置于组织研磨仪中研磨至匀浆状态，离心取上清即为待测样本；

Boxbio试剂盒中部分提取液是可以通用的，可以将指标发过来确认一下，为您做一个提取方案。

提取液相同的指标：SOD、CAT、POD、MDA等；

①测定酶活指标：建议样本越新鲜越好，低温保存时间不建议超过1个月，且避免反复冻融；②测定含量指标：一般建议可以低温保存3-6个月。

谷胱甘肽还原酶、谷氨酰胺合成酶、乙醇脱氢酶、硝酸还原酶、亚硝酸还原酶、辅酶I、辅酶II、线粒体提取、核蛋白提取、活性氧、植物根系活力。

测定含量类指标一般建议3个月内完成检测，酶活性类检测指标建议组织样本1个月内完成测定（且越新鲜越好）。 注：并不能覆盖全部指标，若类似问题由技术根据具体指标稳定性和样本类型确定。

①测定酶活指标制备的粗酶液，建议4℃保存，48h之内完成检测，超出后建议-20℃分装保存，避免反复冻融，1-2周内检测完；②测定含量指标制备的待测样本，建议-20℃保存，建议1-3个月内完成检测。

在制备细胞/细菌样本时，一般使用超声细胞破碎仪，不建议使用超声清洗仪，因为清洗仪是额定功率，不能设定功率和间歇时间，在超声设备使用过程中，会不断放热，需要设定间歇时间放热；

还可以使用反复冻融的方法，收集细胞或组织样本，分装到冻存管中，放置到-80℃冷冻，然后室温或37℃，迅速解冻，反复3-5次。

一般不建议使用裂解液，化学试剂可能会对后续的测定产生影响，一般推荐物理裂解方法。

细胞样本需要破膜，涡旋振荡方式是不可以的，达不到破膜效果；最好采用超声破碎方法，此外还有反复冻融方法，不过效果不如超声破碎方法好。反复冻融方法可参考以下步骤：

1.收集要处理的细胞，可以是培养细胞或组织样本；

2.将细胞悬浮液或组织样本分装到冷冻管或离心管中；

3.将细胞悬浮液或组织样本置于-80℃的冷冻设备中冷冻；

4.将冷冻的细胞悬浮液或组织迅速取出，放入37℃的水浴或室温中，使其迅速解冻；

5.重复以上冻融步骤至少3次，以增强细胞膜的破裂效果。

现用现配试剂一般需要当天完成使用，即24h之内使用。

活性炭：使用药匙进行称取，称量值至少满足说明书标注重量。活性炭作用是为了脱色，具体数值不会影响整个实验。

样本：不需要精准称取，称量可以控制在10%上下波动，实验中记录称重实际数据，最后计算时代入具体数值，对结果没有影响。

特殊注意：土壤样本中测定管和对照管称量值尽量保持一致。

①预热在室温预热就可以，现在的机器（包括分光光度计和酶标仪）一般都内嵌自检程序，自检完成机器显示可以测定，正常检测即可，不需要设定特定温度；

②调零：分光光度需要用蒸馏水调零，或按说明书要求使用相应试剂进行调零；酶标仪不需要调零，机器一般内置空气调零，不需要另外设调零。

能够调整到相应温度并保持恒温都可以使用的，例如恒温水浴，金属浴及恒温培养箱等。

注：酶标板只能用恒温培养箱，不可以使用水浴，水会在板底部凝结，会影响吸光值检测。

一般是由于温度过高或离心管密封不良导致，可以参考以下方法解决：①更换质量较好的离心管，或增加封口膜缠绕圈数；②使用带螺纹旋钮的冻存管（推荐）；③可以尝试在离心管上增设防爆夹。

可以的，蒸馏水、去离子水和超纯水等均适用，对试验结果无影响。

蒸馏水（Distillation H2O）：简称dH2O，经过1次蒸馏而得的水；

双蒸水（Distillation Distillation H2O）：简称ddH2O，经过2次蒸馏而得的水；

纯水（Reverses Osmosis）：简称RO水，即通过反渗透膜过滤后的水,纯水就是去掉了水中的全部电解质与非电解质，也可以说是去掉了水中的全部非水物质；

去离子水（Deionized Water）：简称DI水，是指除去了呈离子形式杂质后的纯水；

超纯水（Ultrapure Water）：简称UP水，水中除了水分子外，几乎没有什么杂质，更没有细菌、病毒、含氯等有机物，也就是几乎去除氧和氢以外所有原子的水；

纯度级别：超纯水＞去离子水＞纯水（RO水）＞蒸馏水

阳性对照是为了证明检测方法有效的一种辅助实验组，即一定能够显示出试验效果的组，与样本测定组形成检出或标准参照；一般多用于酶活测定设置阳性参照，例如：测定葡萄糖氧化酶时，样本无法检出活性，但无法排除是样本问题还是方法问题，那可以选择设置葡萄糖氧化酶纯酶制剂配制为溶液（一定有活性）作为阳性对照，以同样方式进行检测，若阳性对照能够检出，样本无法检出，则可以排除方法造成无法检出的问题，确定为样本异常。注：测定含量指标一般不需要设置阳性对照，因试剂盒内标准品即可起到阳性对照作用。

空白管的设置一般是用于排除因非目标反应或试剂本身颜色对实验结果造成的干扰。

举例：例如葡萄糖含量检测试剂盒，0.025 mg/mL葡萄糖标准液吸光值为0.1，0.1吸光值由0.08（0.025 mg/mL葡萄糖反应产生的吸光值）和0.02（试剂本身颜色产生的吸光值）组成，空白组吸光值0.02（试剂本身颜色产生的吸光值），所以需要计算，∆A标准=A标准-A空白，排除本身颜色产生的吸光值才是葡萄糖真实产生的吸光值。

通俗解释：中午餐厅吃饭，结账时盘子是不能收费的，需要排除盘子的重量才是真实菜的重量，盘子加菜的重量是A测定或A标准，盘子的重量就是A空白，盘子重量一般是一样的，一般测定1-2次就行了。

不可以的，建议将待测样本或粗酶液稀释后再进行测定，不推荐您对显色后液体稀释后测定，应与标曲或空白体系和操作方式保持一致，若仅稀释显色后样本，标曲不进行稀释会产生一定误差。

①根据材质常用的可以分为聚苯乙烯、石英玻璃、聚丙乙烯等，其中石英玻璃板耐腐蚀，可以在全波段通用，可以重复使用；聚丙乙烯不耐腐蚀，会被甲苯、乙醚等有机溶剂腐蚀；

②根据用途可以分为细胞培养板和酶标板，两者外观一致，区别在于孔与孔之间的吸光值背景均匀度不同，细胞培养板孔与孔之间的均匀度并非严格一致，酶标板孔与孔之间的均匀度一般比较均匀。

①分光光度计的光路一般在比色皿的1/2—2/3位置，试剂盒配制的反应体系在1 mL左右，检测时吸取1 mL进行检测，使用3 mL比色皿时，液面在光路以下，无法检测液体的吸光值。

②建议采购1 mL的比色皿（可以在淘宝采购，总体积为1.05 mL，光径10 mm，狭缝3 mm），（已经制备好反应体系的情况）也可用临时检测的方法，将3 mL的比色皿使用离心管帽或者海绵垫高，使光路能通过检测液体。

注：针对1 mL比色皿与设备是否匹配的问题：1 mL和3 mL比色皿外观和尺寸是一致的，设备是可以通用的。

普通酶标板适用波长范围400-1200 nm；96孔UV板适用波长范围200-400 nm；

紫外线透过性弱，普通96孔板通常由聚苯乙烯（PS）制成，这种材料虽然具有良好的化学稳定性和生物相容性，但其表面无法透过紫外光。96孔UV板则采用特殊的处理工艺，如硅烷化或氮化处理，并且其底部是透明的，可以透过紫外线。

如何区分：普通96孔酶标板与96孔UV板外观十分相似，无法用肉眼区分，可以通过在紫外波段（200-400 nm）检测蒸馏水的吸光值判定是否为96孔UV板，蒸馏水检测吸光值大于3.0即为普通96孔酶标板，吸光值很小（一般小于0.1）即为96孔UV板。

若试剂盒需要制作标准曲线，可以在指定波长上 +/- 10 nm；

若根据摩尔吸光系数计算，则需要固定波长，不能改变，如丙二醛含量检测试剂盒，必须检测532 nm处的吸光值。

①若测定吸光值（A测定或ΔA测定）高于标准曲线最高值：建议对待测样本进行稀释，稀释后再按照说明书上的体系进行反应和吸光值测定，直至吸光值落在范围内即可，计算时相应修改（乘以稀释倍数）。

注：稀释时要稀释待测样本，不能稀释显色反应后的溶液；按照说明书注意事项用提取液或蒸馏水进行稀释。

②若测定吸光值（A测定或ΔA测定）低于标准曲线最低值：则需要制备更高浓度的样本，其中组织样本最高制备20% 组织匀浆（现10% 组织匀浆），细菌或细胞样本最大制备浓度2000 万/mL（原浓度500 万/mL）；若样本是液体样本或已经是20% 组织匀浆，建议增加待测样本在反应体系中的上样量，最后使吸光值落在检测范围内即可。

注：增加待测样本在反应体系中的上样量时，后续计算需要相应的进行消除（如增加2倍，后续计算需除2）。