细胞增殖与毒性检测试剂盒
Cell Counting Kit-8
AKCE001-1
100T
-
100 Samples
产品信息
Cell Counting Kit-8
100 Samples
酶标仪/96孔板
-
按照标签要求储存
检测原理

Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 作为MTT法的替代方法,可对细胞增殖和细胞毒性进行快速、高灵敏度、无放射性的比色检测,广泛应用于抗肿瘤药物筛选、生物活性因子检测、细胞增殖或毒性测定、肿瘤药敏等试验。

CCK-8试剂无需预配即可直接加入细胞样品中,试剂中含有WST-8 [2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium,monosodium salt],WST-8在电子耦合试剂(1-Methoxy PMS)的作用下被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色Formazan,产物数量与活细胞数量呈线性关系,通过测定450 nm处吸光值的变化即可反映活细胞的数量。

  • CCK-8
  • 450 nm
  • 递增型
注意事项

①CCK-8的培养时间一般为1-4小时,需要摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间,CCK-8的最佳反应时间以具体显色最佳时间为准;

②孵育时间因细胞类型和数量而异;白细胞着色较弱,可能需要较长的孵育时间或大量细胞;

③当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量为1000个细胞/孔(100 μL培养基);检测白细胞时的灵敏度相对较低,推荐接种量应不低于2500个细胞/孔(100 μL培养基);如果要使用24孔板或6孔板,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液;

④如果没有450 nm滤光片,可以使用430-490 nm之间的滤光片,但450 nm检测灵敏度最高。如果您需要进行双波长测定,650 nm处的吸光度可作为参考波长进行测定;

⑤培养基中的酚红不会影响实验结果,酚红的吸光度可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去;

⑥本产品可以检测E.coli,但不能检测酵母细胞;

⑦如果您需要对CCK-8溶液进行无菌处理,请使用0.2 μm滤膜过滤除菌;

⑧使用96孔板进行检测时,96孔板外圈孔位易蒸发,如果细胞培养时间较长,可以选择弃用外圈孔位,或改加等量的PBS、水或培养液作为填充液。

注: 为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书为准),确认试剂储存和准备是否 充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异交的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。
标准曲线
注:不同仪器及比色材质会对结果产生影响,以实际测定值为准。
引用文献
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