①提取和测定过程均需在冰上进行以免酶失活,粗酶液制备完成后需当日完成测定;
②准确在15 s和75 s时间点完成吸光值测定,以确保实验结果的准确性和重复性;若同时测定多个样本,建议使用多道移液器且分批进行检测,以确保组间反应时间一致;
③若吸光值超过3.0,请检查酶标板使用的是否为96孔UV板;
④若A2测定或若∆A测定大于0.8,建议将粗酶液使用试剂一适当稀释后再进行测定;若∆A测定小于0.02,建议适当延长酶促反应时间或制备更高浓度样本后再进行测定,计算时相应修改;
⑤试剂二配制后有效期较短,为便于试验安排,附赠一瓶作为备用,每瓶均可满足至少100个样本的测定用量;