①试剂四和试剂六配制后有效期较短,为便于实验安排,均附赠一支作为备用,每支均可满足至少50个样本的检测用量;
②提取过程应严格在冰浴条件下进行;
③测定过程中试剂四应用液、试剂六应用液和待测样本应置于冰上放置,以免变性和失活;
④提取过程中第一次离心后的上清液若为浑浊属于正常现象,不影响检测结果;
⑤提取液出现晶体析出属于正常现象,50-60℃水浴加热至完全溶解,冷却至室温后使用即可;
⑥准确在10 s和190 s处完成吸光值测定,以确保检测结果的准确性和重复性;
⑦若A2测定超出标准吸光值线性范围:高于最高值建议将待测样本使用蒸馏水适当稀释后再进行测定,低于最低值建议制备更高浓度的样本后再进行测定,计算时相应修改;
⑧若吸光值超过3,建议检查比色皿是否为石英比色皿(Q),玻璃比色皿(G)会因材质问题造成吸光值接近或超出设备量程;
⑨提取液中含有蛋白沉淀组分,待测样本不能直接用于蛋白含量测定,若使用蛋白浓度计算ATP含量,则需要另取样本使用PBS或生理盐水按照相同步骤制备为待测样本,再进行蛋白浓度测定;