①样本应尽量保持新鲜，采样后建议尽快完成测定；

②粗酶液制备过程建议在冰上进行，切勿使用液氮处理样本，且提取后需当天完成检测，严禁冷冻保存，反复冻融对乙醇脱氢酶稳定性有较大影响；

③粗酶液不能用于蛋白浓度测定，若需要使用蛋白浓度计算结果，需另取样本使用PBS或生理盐水按照相同比例，单独提取后再进行蛋白浓度测定；

④试剂二配制后有效期较短，为便于试验安排，附赠一支试剂二作为备用，每支均可满足至少100个样本的测定；

⑤若吸光值大于3.0，请确认96孔板是否为96孔UV板；

⑥若A1测定大于1.5或∆A大于0.5，建议将粗酶液使用蒸馏水适当稀释后再进行测定；若∆A小于0.02，建议适当增加样本量或延长酶促反应时间（延长5-10 min）后再进行测定，计算时相应修改；

⑦准确在15 s和75 s处完成吸光值测定，以保证实验结果的准确性和重复性；若同时测定多个样本，应使用多道移液器且分批进行测定，以确保组间反应时间一致；