中山大学陈泽良课题组-苏博士
SCI文献中使用产品: 肌酐含量检测试剂盒AKMNM008M、直接胆红素含量试剂盒AKBL014M
文章标题:A universal viral capsid protein based one step RNA synthesis and packaging system for rapid and efficient mRNA vaccine development
客户评价:很好,建议说明书更加简洁明了
AKAO023-髓过氧化物酶(MPO)活性检测试剂盒
原理:髓过氧化物酶可催化H2O2分解,同时将邻联茴香胺氧化生成有色物质,产物在460 nm处具有特 征吸收峰,通过吸光值变化即可表征髓过氧化物酶的活性。

Q:检测时出现浑浊怎么办?
A:环境的温度较低时,可能出现会出现浑浊或凝固,在37℃加热至反应液澄清后再进行吸光值测定即可。
Q:吸光值超出超出检测范围怎么办?
A:若A测定大于1.2或ΔA大于0.5,建议将粗酶液进行稀释后再测定,稀释时建议使用试剂一对粗酶液进行稀释,时吸光值落在范围内即可。
若ΔA小于0.02,一般是粗酶液中酶活性较低,建议延长酶促反应时间;也可以适当增加样本的浓度:①增加粗酶液在反应体系中的上样量,其他试剂不变;②在制备粗酶液时,增加样本的量,如组织样本可以制备20%的匀浆(原10%组织匀浆)
测定酶活性指标时,若吸光值没有在范围内,该如何调整?
1.若吸光值高于检测范围,建议对粗酶液进行稀释,稀释后再按照说明书上的体系进行反应和吸光值测定,直至吸光值落在范围内即可,计算时相应修改(乘以稀释倍数)。
注:稀释为粗酶液稀释,不能稀释显色反应后的溶液;按照说明书注意事项用提取液或蒸馏水进行稀释。
2.若吸光值低于测定范围最低值,一般建议三种方法:①制备更高浓度的样本(组织样本最大20%组织匀浆;细菌或细胞样本最大制备浓度2000 万/mL);②增加粗酶液在反应体系中的上样量(最大增加2倍);③延长酶促反应时间(一般说明书中准备反应时间为酶促反应时间,一般建议增加5-10倍)。根据实验不同的情况建议不同的调整方案,具体方法可参照下列方案:
结果初步判定
首先确认吸光值ΔA的大小,ΔA在 -0.02—0.02范围,表明样本中酶活性较低,此时吸光值差值会出现或正或负的值,吸光值差值很小且无规律,一般是由系统误差(操作、设备等稳定性)造成的波动,此时吸光值差值可以默认为零,即未检出活性;
检查吸光值是否超出检测范围
(1)若A测定大于检测范围最大值,ΔA小于0.02:表明样本的背景值较高,建议先对待测样本进行稀释,使A测定落在检测范围内,同时使用方法③,增加ΔA的值;
(2)若A测定在检测范围内,则根据A值的大小推荐调整方案:当A值低于限定范围最大值的1/4时,建议使用方法①+②+③;当A值低于限定范围最大值的1/2时,建议使用方法①+③或②+③;当A值高于限定范围最大值的1/2时,建议使用方法③。
注:若有标准曲线且标准曲线和粗酶液的上样量是对等体系时,不可推荐①和②,只能使用方法③。