α-酮戊二酸脱氢酶活性检测试剂盒
α-Ketoglutarate Dehydrogenase (α-KGDH) Activity Assay Kit
AKAC010M
100T/96S
酶标仪
96 Samples
产品信息
α-Ketoglutarate Dehydrogenase (α-KGDH) Activity Assay Kit
96 Samples
酶标仪/96孔UV板
3 h (100 Samples)
按照标签要求储存
检测原理
α-酮戊二酸脱氢酶催化α-酮戊二酸、NAD+和CoA生成琥珀酰CoA、CO2和NADH,NADH在340 nm具有特征吸收峰,通过吸光值变化即可测定NADH的生成速率,进而表征α-KGDH的活性。
  • NADH速率法
  • 340 nm
  • 递增型
注意事项

①测定过程中所有试剂和样本在冰上放置,以免变性和失活;

②比色皿中反应液的温度必须保持37℃或25℃,取烧杯装入一定量37℃或25℃的蒸馏水,将烧杯放入37℃或25℃水浴锅中,在反应过程中将比色皿连同反应液放在此烧杯中;

③准确在0 s和120 s处完成读数,以保证实验结果的准确性;

④∆A测定应在0.01-0.25之间,若∆A测定大于0.25,需将样本进行稀释后再进行测定;

⑤提取液中含有一定浓度的蛋白(约1 mg/mL),测定样品蛋白浓度时需减去提取液的蛋白含量。

注: 为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书为准),确认试剂储存和准备是否 充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异交的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。
标准曲线
注:不同仪器及比色材质会对结果产生影响,以实际测定值为准。
引用文献
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