α-酮戊二酸脱氢酶活性检测试剂盒
α-Ketoglutarate Dehydrogenase (α-KGDH) Activity Assay Kit
AKAC010M
110T/100S
酶标仪
100 Samples
产品信息
α-Ketoglutarate Dehydrogenase (α-KGDH) Activity Assay Kit
100 Samples
酶标仪/96孔UV板
3 h (100 Samples)
按照标签要求储存
检测原理
α-酮戊二酸脱氢酶催化α-酮戊二酸、NAD+和CoA生成琥珀酰CoA、CO2和NADH,NADH在340 nm具有特征吸收峰,通过吸光值变化即可测定NADH的生成速率,进而表征α-KGDH的活性。
  • NADH速率法
  • 340 nm
  • 递增型
注意事项

①测定过程中所有试剂和粗酶液均需在冰上放置,建议提取完成后当天完成活性检测;

②准确在规定时间点完成吸光值测定,以确保检测结果的准确性和重复性;若同时测定多个样本时,应使用多道移液器且分批进行测定,以确保组间反应时间一致;

③∆A测定应在0.01-0.25之间:若ΔA大于0.25,建议将粗酶液使用蒸馏水适当稀释后再进行测定;若ΔA小于0.01,建议适当延长酶促反应时间(恒温准确反应2 min,可以延长至10 min以上),或制备更高浓度的粗酶液后再进行测定,计算时相应修改;

④提取液A中含有约1 mg/mL蛋白,测定样品蛋白含量后需减去试提取液A自身的蛋白含量;

⑤为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书内容为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。

注: 为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书为准),确认试剂储存和准备是否 充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异交的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。
标准曲线
注:不同仪器及比色材质会对结果产生影响,以实际测定值为准。
引用文献
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