辅酶Ⅱ NADP(H)含量检测试剂盒
Coenzyme Ⅱ NADP (H) Content Assay Kit
AKCO018C
120T/25S
可见分光光度计
25 Samples
产品信息
Coenzyme Ⅱ NADP (H) Content Assay Kit
25 Samples
可见分光光度计/1 mL玻璃比色皿(d=10 mm)
4 h (25 Samples)
按照标签要求储存
无水乙醇(C2H6O,MW=46.07,CAS: 64-17-5)
检测原理
通过酸性和碱性提取液分别提取样品中NADP+和NADPH,NADPH可通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)生成甲瓒,产物在570 nm处具有特征吸收峰;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脱氢酶(Glucose 6-Phosphate Dehydrogenase, G6PDH)还原为NADPH,进一步采用MTT还原法生成甲瓒,通过吸光值变化即可定量检测辅酶Ⅱ NADP (H) 的含量。
  • MTT还原法
  • 570 nm
  • 递增型
注意事项

①试剂二、试剂三、试剂四配制后有效期较短,为便于试验安排,各附赠一瓶作为备用,每瓶均可满足至少25个样本的测定;

②2 µmol/mL NADP+和2 µmol/mL NADPH标准液配制后4℃可保存1周,严禁-20℃保存;

③实验过程中吸取上清液时应避免吸入沉淀物而影响结果的准确性;

④反应时间对实验结果有较大影响建议精确控制,测定样本较多时建议分批进行测定,以避免组内反应时间不一致对结果造成影响;

⑤反应体系中试剂不能按比例配制为混合液使用,必须按反应体系顺序依次加入;

⑥若A测定大于1.2,建议将待测样本适当稀释后再进行测定,计算时相应修改;

注: 为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书为准),确认试剂储存和准备是否 充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异交的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。
标准曲线
NADP+ & NADH
y=0.6226x-0.0099 (R2=0.999)
0.08-2.0 nmol/mL
0.02 nmol/mL
注:不同仪器及比色材质会对结果产生影响,以实际测定值为准。
引用文献
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