①根据乙酰化程度不同，需调整试剂七加入量，控制A测定处于0.1-0.8之间可保证结果准确性：

·若A测定大于0.8：建议将反应液使用试剂七适当稀释后再进行吸光值测定，可以设置几个梯度进行预实验确定稀释倍数，使A测定小于0.8即可，计算时修改公式中稀释倍数D即可；例如吸取100 μL反应液加入900 μL试剂七后充分混匀再进行吸光值测定，该条件下稀释倍数为10；

·若A测定小于0.1：建议适当减少试剂七的加入量使A测定大于0.1，例如吸取10 μL上清液加入490 μL试剂七，改为吸取10 μL上清液加入240 μL试剂七进行预实验，计算时修改公式中VS7即可（带入实际试剂七使用体积）；

②乙酰化反应过程较为剧烈，建议使用带盖密封性较好的冻存管或玻璃试管作为反应容器，请确保无橡胶等易腐蚀材质（或不与橡胶材质接触），以免造成泄漏；

③称取样本时重量范围可参考4-10 mg范围内均可，将样本具体称量质量带入公式W即可；